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专利名称:一种通过改善细胞膜通透性有效生产维生素K2的方法

文章来源: 发布时间: 2021-07-20

专利名称:一种通过改善细胞膜通透性有效生产维生素K2的方法

申 请 号 

CN201710828555.9

申 请 日 

20170914

公开(公告)号

CN107475312B

公开(公告)日 

20210518

申请(专利权)人 

中国科学院合肥物质科学研究院

发 明 人 

郑之明; 杨强; 赵根海; 刘会; 王鹏; 王丽; 方雪; 孙小雯; 倪文枫

专利类型 

发明专利

摘 要 

本发明公开了一种通过改善细胞膜通透性有效生产维生素 K2 的方法,包括如下步骤:(1)将维生素 K2 生产菌株接种于斜面培养基中活化;(2)将活化后的菌株接种于添加有非离子型表面活性剂的种子培养基中培养;(3)将得到的培养液继续接种于添加有非离子型表面活性剂的种子培养基中培养;(4)将培养液接入发酵培养基中,100- 700rpm,0.5- 5vvm 培养 144- 240h;发酵至 0- 72h 时,添加非离子型表面活性剂,并采用插入式低功率超声间隔处理,定时取样检测细胞和维生素K2 浓度。本发明的优点在于:提供了简便、有效、经济的发酵工艺,有效提高维生素 K2 浓度,提高生产效率,降低生产成本。

主权项 

一种通过改善细胞膜通透性有效生产维生素 K2 的方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)菌株活化将维生素 K2 生产菌株纳豆芽孢杆菌接种于斜面培养基中进行活化,所述纳豆芽孢杆菌的编号为 NKCCMR NK 2.新 natto; (2)一级种子制备将活化后的维生素 K2 生产菌株接种于添加有非离子型表面活性剂的种子培养基中培养12- 24h,制成一级种子备用;所述非离子型表面活性剂具体为 Span、Tween、Triton、OP 和 POE 中的一种;所述步骤(2)中非离子表面活性剂浓度范围0.01- 8g/L;(3)二级种子制备按照接种量 3%- 10%将步骤(2)得到的一级种子培养液接种于添加有非离子型表面活性剂的种子培养基中培养 12- 16h,制成二级种子备用;所述非离子型表面活性剂具体为 Span、Tween、Triton、OP 和 POE中的一种;所述步骤(3)中非离子表面活性剂浓度范围 0.01- 8g/L; (4)发酵培养按装液量 40%- 70%,接种量 1%- 15%将二级种子培养液接入发酵培养基中,100- 700rpm,0.5- 5vvm 培养 144- 240h;发酵至 0- 72h 时,在培养基中添加非离子型表面活性剂,并采用插入式低功率超声间隔处理,定时取样检测细胞和维生素 K2 浓度,所述步骤(4)中插入式低功率超声间隔处理的超声功率为100- 500W,频率为 10- 30KHz,插入式低功率超声间隔处理的处理时间为发酵24- 96h 后每隔 12- 24h 超声 30- 400s,作用 3s,间歇 4s;所述非离子型表面活性剂具体为 Span、Tween、Triton、OP 和 POE 中的一种;所述非离子表面活性剂加入方式是一次性加入、分批加入或流加,浓度范围 0.01- 50g/L。

IPC信息 

IPC主分类号 

C12P7/66

IPC分类号 

C12P7/66

   

C 化学;冶金

C12 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程

  C12P 发酵或使用酶的方法合成目标化合物或组合物或从外消旋混合物中分离旋光异构体

   C12P7/00 含氧有机化合物的制备

     *C12P7/66 含有醌型结构

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